品牌: /Merck原装
仅供科研实验使用
型号: 1245680100
CAS号: 39450-01-6
货号：1245680100
存贮条件: 2℃-8℃此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定，还具有降解天然蛋白质的能力，因而它应用很广泛，包括制备脉冲电泳的染色体DNA，蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作浓度是50—100μg/ml。在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性。
推荐反应缓冲液：50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。
蛋白酶k配制标准：20mg/ml蛋白酶K配制标准(proteinase K)：将200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中，轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。蛋白酶K的保存：保存在-20℃冰箱里，避免反复冻融，有效保证12月。
孵育温度为55至65℃，理想孵育温度为58℃，孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。
作用：蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理，它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用，以增加探针与靶核酸结合的机会，提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时，都会对细胞的结构有一定的破坏，导致组织切片的脱落，细胞核的消失，从而影响杂交结果。EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用，解决上述出现的问题，并能达到理想的染色效果。
蛋白酶K的应用比较广泛，它可以消化包围靶DNA蛋白，因此使用蛋白酶K能够增加探针与靶核酸结合的机会增强杂交信号，但在使用蛋白酶K时要主要使用的浓度，过高或者过低都会破坏细胞的结构、核消失等影响试验结果。
英文名称：Proteinase K from Tritirachium album
CAS号：39450-01-6
级别：Chromatographically purified
分子量：～18kDa
Activity (hemoglobin，pH 7.5; 37 °C)：≥ 30mAnsonU/mg
Specific activity：≥40mAnsom u/mg protein
DNases (Nicking activity，pBR 322，6 h，37℃)：Not detectable
RNases (RNA，2 h，37℃)：Not detectable
Solubility in water：(20 ℃) soluble
pH value：6.2～6.8 (10 g/l，H
2
O，20℃)
性状：白色或类白色粉末，是一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶， 来源于白色念球菌(. Tritirachium album. )，具有很高的比活性。EDTA等鳌合剂或SDS等去垢剂不能使蛋白酶K失活，反而增强和稳定酶活性，并在较广的PH范围内（PH4-12.5）均有活性。在组织或细胞核酸分离时，使核酸酶（RNA和DNA）以及反应中其他酶失活。
用途：生化研究。广谱蛋白酶，95C 加热10 分钟，则完全失活。可替代 DEPC 处理 RNA 抽提用的离心管和抢头，实现灭活 RNase A 的目的，也用于处理 RNase-Free的水。充分降解组织或细胞中蛋白质分子特别是核酸，以达到释放和萃取高质量核酸的辅助试剂。用于质粒或基因组DNA、RNA的分离以及蛋白多肽印迹实验。
保存：2～ 8℃